МКОУ "СОШ с. Псыншоко"

МКОУ "СОШ с. Псыншоко"

Добро пожаловать на наш сайт!

Выписка из бти: Заказать справку БТИ о наличии или отсутствии собственности

Справка БТИ — Альянс-ГЕО

Справки БТИ – виды и когда востребованы?

Сотрудники Бюро технической инвентаризации готовы выдать гражданину десятки видов приложений, справок, планов, проектов, паспортов. Каждый документ актуален при определенных обстоятельствах, связанных с мероприятиями по недвижимости. Данные услуги востребованы как юридическими, так и частными лицами. Если вам необходимы план земельного надела или справка из БТИ, но нет представления, с чего начать сбор документов, то лучше всего обратиться к услугам нашей компании. Сотрудники организации знают, какие конкретно документы необходимы для решения того или иного вопроса. Мы гарантируем юридическую чистоту документа. Все мероприятия осуществляются оперативно и в соответствии с поставленной задачей. Специалистами нашей компании являются кадастровые инженеры, которые берут на себя все вопросы, связанные с оформлением документов, связанных с недвижимостью. При необходимости мы представим интересы клиента в судебной инстанции.

В Бюро технической инвентаризации гражданин может получить следующие виды документов:

  • справки, востребованные при оформлении земельных отношений;
  • справки о стоимости жилых помещений;
  • планы земельного участка, квартиры, этажей;
  • экспликация, как приложение к техническому плану;
  • выписка из паспорта домовладения и технического паспорта;
  • справка о состоянии строения и помещений.

Все необходимые сведения в Бюро технической инвентаризации обрабатываются, а далее, как того требует законодательство, предоставляются владельцам недвижимости и третьим лицам. Документы оформляются в соответствии с мероприятиями, которые предусмотрены в отношении объекта недвижимости. В БТИ можно получить различные справки, выписки, паспорта и др.

База данных БТИ имеет определенную структуру, что позволяет получить необходимые документы оперативно. Это касается сведений о квартире, отдельных элементах зданий, качестве и характеристике. Законодательством определен срок выдачи документов. Но следует понимать, что период выдачи необходимых справок может растянуться. Для ускорения процедуры взаимодействия с контролирующим органом, нужно обратиться к помощи опытных юристов. Специалисты подготовят все необходимые документы. Благодаря этому заказчик может получить нужные справки быстро и без проблем.

Многие граждане ни разу не сталкивались в своей жизни с выпиской из БТИ на жилье, не знают, что такое оперативное внесение изменений в технический паспорт и не понимают, как следует подготовить документы при продаже или покупке квартиры. Если это относится к вам, то наша компания предлагает вам услугу в мероприятиях, связанных с недвижимостью. Все работы доступны по стоимости.

Чтобы получить необходимые справки, потребуется заявление, которое гражданин должен написать в БТИ. Вместе с заявлением требуется представить документы правоустанавливающего характера, оплатить госпошлину. Чтобы выполнить заявку, сотрудникам БТИ потребуется до двух недель.

Наша компания предлагает клиентам услуги оформления документов, без которых невозможны мероприятия, связанные с недвижимостью. Это может быть перепланировка, купля-продажа, раздел имущества, наследование квартиры и многое другое. Мы предлагаем услуги по доступной цене.

Чтобы получить помощь профессионалов, необходимо позвонить сотрудникам компании. Вы можете получить сведения о виде справок, которые выдает организация, стоимости этих документов, особенностях создания кадастрового паспорта квартиры и технического состояния жилых помещений.

Справки БТИ

Справка БТИ − это документ, который подтверждает те или иные данные, касающиеся объекта недвижимости. Выдавать подобную справку имеет право компания или кадастровый инженер, получивший право проведения кадастровых работ.

Наше Тверское городское БТИ имеет разрешение СРО на проведение кадастровых и топографических работ и имеет право выдавать подобные справки.

Для чего могут потребовать справки БТИ?

Справки БТИ могут потребоваться:

  1. Для банка в случае, если владелец получает ипотечный кредит или кредит под залог имущества.
  2. Для суда, если необходимо уточнение технических характеристик здания или помещения.
  3. Для отделов опеки и попечительства при решении вопросов, где лучше будет проживать ребенку.

Возможны и другие варианты. Например, справку БТИ может просить покупатель недвижимости у продавца, чтобы удостовериться, что он приобретает именно то жилье, которое описано в договоре. Хотя, конкретно в этом примере, мы советуем получить технический план на помещение и межевой план на земельный участок. Это более четкие и подробные документы.

Подтверждение права собственности

Ранее справка БТИ могла служить подтверждением права собственности на недвижимость. В настоящее время таким документом является свидетельство о государственной регистрации права собственности на недвижимость.

Инвентарная стоимость больше не актуальна

Ранее одним из важнейших назначений справки из государственного бюро технической инвентаризации было указание на инвентарную стоимость здания или помещения. Эта была формальность, которая была необходима по требованию суда исходя из законодательных актов. Инвентарная стоимость всегда была значительно ниже реальной рыночной и играла непонятную роль в реальной жизни.

Сейчас инвентарная стоимость потеряла какую-либо актуальность и БТИ больше не дают такие данные.

Сейчас актуальны другие параметры:

  • реальная рыночная стоимость,
  • кадастровая стоимость.

Реальная рыночная стоимость определяется по довольно сложной схеме и определяет ее независимые оценщики. Стоимость эта определяется из текущей рыночной ситуации, из конъюнктуры рынка, от площади объекта, от категории, от состояния, местонахождения и прочих данных.

Кадастровая стоимость − это цена недвижимости, которая записана в Едином государственном реестре недвижимости. Исходя из это стоимости исчисляется налог на недвижимость, который ежегодно обязан уплачивать владелец. Как правило эта стоимость немного ниже реальной рыночной. Но бывают исключения. В этом случае необходимо оспаривание кадастровой стоимости.

Пользуйтесь услугами Тверского городского БТИ

Обращайтесь в Тверское городское БТИ. Наши специалисты бесплатно проконсультируют вас по любым вопросам и предложат вам оптимальный вариант решения вашей проблемы, как по деньгам так и по срокам. С нами работать удобно!

Напишите прямо сейчас

Что такое бти: расшифровка и чем занимаются, паспорт, выписка справка из бти — что это такое

Чтo нyжнo, чтoбы зaкaзaть дoкyмeнты в бюpo инвeнтapизaции

Чтoбы пoлyчить выпиcкy, cпpaвкy из БTИ, зaкaзaть пacпopт или тexплaн oбъeктa, нeoбxoдимo пoдaть зaявлeниe ycтaнoвлeннoгo oбpaзцa в ближaйшee oтдeлeниe гocyдapcтвeннoй opгaнизaции и пpeдocтaвить дoкyмeнты:

📘 cвидeтeльcтвo, кoтopoe пoдтвepждaeт пpaвo coбcтвeннocти зaявитeля нa oбъeкт;

📘 пacпopт зaявитeля, ecли c зaпpocoм oбpaщaeтcя дoвepeннoe лицo — eгo пacпopт и нoтapиaльнo зaвepeннyю дoвepeннocть.

Cтpyктypa БTИ

Бюpo включaeт мyниципaльныe и фeдepaльныe opгaны БTИ, кoтopыe пoлyчили гocaккpeдитaцию и paбoтaют пo вceй тeppитopии cтpaны. Caмoe кpyпнoe пpeдпpиятиe дaннoй cтpyктypы — AO «Pocтexинвeнтapизaция». B cтpyктypy бюpo вxoдят кaк кoммepчecкиe пpeдпpиятия, тaк и oтдeлы, кoтopыe paбoтaют пo гocyдapcтвeнным дoтaциям.

B кaждoм филиaлe дeйcтвyeт линeйнaя фopмa opгaнизaции: глaвнoмy pyкoвoдcтвy — диpeктopy — пoдчиняютcя нaчaльники и coтpyдники бyxгaлтepcкoгo и тexничecкoгo oтдeлa. B бюpo paбoтaют юpиcты, лицeнзиpoвaнныe кaдacтpoвыe инжeнepы, гeoдeзиcты и дpyгиe cпeциaлиcты.

Интepecнo! B филиaлax БTИ чиcлeннocть пepcoнaлa мoжeт вapьиpoвaтьcя oт нecкoлькиx дecяткoв дo нecкoлькиx coтeн coтpyдникoв. Taкoe нepaвeнcтвo oбъяcняeтcя paзным oбъeмoм paбoт, кoтopыe дoлжны выпoлнять бюpo в нeбoльшиx гopoдax, и, нaпpимep, в cтoлицe. B кpyпныx paйoнныx цeнтpax инвeнтapизaциoннoe бюpo opгaнизoвaнo кaк мyниципaльнoe пpeдпpиятиe.

B пpoцecce paбoты бюpo coтpyдничaeт и пpeдocтaвляeт нyжныe дoкyмeнты дpyгим гocyдapcтвeнными и кoммepчecким opгaнизaциям:

🏦 yпpaвляющим кoмпaниям ЖКX;

🏦 кoмитeтaм пo зeмлeycтpoйcтвy;

🏦 opгaнaм Pocpeecтpa;

🏦 гpaдocтpoитeльным и apxитeктypным кoмиccиям;

🏦 opгaнaм cyдeбнoй cфepы;

🏦 cтpaxoвым кoмпaниям, бaнкaм, нoтapиycaм.

Кoмy пoдчиняeтcя БTИ

Фeдepaльнoe БTИ пo pocтexинвeнтapизaции пpeдocтaвляeт coбpaннyю инфopмaцию пpo oбъeкты нeдвижимocти в EГPП — eдиный гocyдapcтвeнный peecтp пpaв, кoтopый фopмиpyeт eдиный гocyдapcтвeнный peecтp нeдвижимocти.

Cтoимocть ycлyг opгaнизaции

Oтдeлeния БTИ пpeдocтaвляeт cвoи ycлyги — cпpaвки и кoнcyльтaции — нa кoммepчecкoй ocнoвe. Cтoимocть ycлyг ycтaнaвливaeтcя oтдeльнo в кaждoм oтдeлeнии и мoжeт oтличaтьcя дaжe в пpeдeлax oднoгo гopoдa.

Цeны зaвиcят oт типa нeoбxoдимoй дoкyмeнтaции и ycтaнoвлeнныx зaкaзчикoм cpoкoв: чeм быcтpee нyжeн oтвeт, тeм дopoжe ycлyгa.

Эффективность Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) и экстрактов четырех растений в отношении смертности и развития Culex quinquefasciatus Say (Diptera: Cullicidae) | Egypt Journal of Biological Pest Control

Ларвицидная активность

Bti и растительных экстрактов

Все растительные экстракты и Bti показали выраженную ларвицидную активность. Через 24 часа лечения Bti и N . Экстракт sativa проявлял самую высокую ларвицидную активность со значениями LC 50 , равными 7.184 и 14,59 мг/л соответственно (таблица 1). Между тем, экстракт C . osmophloeum (LC 50  = 32,10 мг/л) был относительно сильным токсикантом. Наименьшая ларвицидная активность отмечена у М . ромашка и S . Экстракты indicum (LC 50  = 51,22 и 62,53 мг/л) соответственно. С другой стороны, все протестированные экстракты и Bti показали более высокую ларвицидную активность через 48 часов. Результаты также показали, что растительные экстракты менее токсичны для личинок, чем Bti .

Таблица 1 Относительная токсичность Bacillus thuringiensis var. israelensis и четыре растительных экстракта против Culex quinquefasciatus после 24- и 48-часового воздействия

Некоторые биологические особенности, такие как периоды развития, скорость окукливания и скорость появления взрослых особей, заметно различались (таблицы 2 и 3). Периоды развития личиночной стадии чрезвычайно удлинялись после обработки самыми низкими концентрациями C . осмофлеум , М . ромашка и N . sativa , в то время как самые длинные личиночные периоды составляли 10,75 и 9,60 дней, которые были зарегистрированы после обработки N . сатива и C . osmophloeum при 10 и 25 мг/л соответственно.

Таблица 2 Эффект Bacillus thuringiensis var. israelensis и некоторые растительные экстракты на некоторые биологические аспекты после обработки личинок 4-го возраста Culex quinquefasciatus israelensis и некоторые растительные экстракты по некоторым биологическим аспектам после обработки личинок 4-го возраста Culex quinquefasciatus

Скорость окукливания значительно снижалась по мере увеличения концентрации. Максимальное снижение составило 16% при концентрации 1,25 мг/л Bti , 17% при концентрации 50 мг/л C . osmophloeum и 18,2% при концентрации 55 мг/л N . сатива (таблица 1).

После лечения 1,25 мг/л Bti и 55 мг/л N взрослых особей не появилось. сатива. Несколько форм морфологических пороков развития возникли в результате обработки личинок. Аномальные личинки были пигментированы и скручены, а также представляли собой личиночно-куколочные промежуточные образования (куколки-фараты), тогда как деформированные куколки были куколками-альбиносами с черноватой головогрудью. Аберрации взрослых особей заключались в нарушении экзогенности, кроме деформированного брюшка и ног. Что касается морфологических аномалий, то аберрации личинок и куколок достигали наибольших значений при концентрациях С . osmophloeum (50% при концентрации 25 мг/л и 21,2% при концентрации 35 мг/л). Видно, что N . сатива и М . ромашка вызывала наибольший эффект на стадии куколки, 20 и 30,4% при 35 мг/л соответственно (таблицы 2 и 3).

В настоящем исследовании Bti показали хорошую активность в отношении Cx . quinquefasciatus и вызывали высокую смертность.

Кроме того, завод особенно выделяет N . сатива и C . osmophloeum показал высокую токсичность по отношению к насекомым .

Полученные результаты согласуются с результатами Lacey et al. (1984), которые заметили, что Bti и Bacillus sphaericus ( Bs ) были полезны для контроля плотности личинок комаров в широком диапазоне мест обитания и сокращения популяций взрослых комаров.

Томас и др. (2017) обнаружили, что масла гвоздики и корицы обладают высокой токсичностью в отношении лабораторных Anopheles gambiae и диких An.arabiensis с LC 50 159,1 и 131,45 мкг/л соответственно через 24 ч после обработки. Ahmed (2007) продемонстрировал, что при кормлении взрослых особей 90 003 An. gambiae на смеси 3% масла черного тмина и 10% раствора глюкозы вызывали значительное снижение общего числа полностью развитых ооцист у комаров. Масла

S. indicum , N. sativa и Allium cepa были высокотоксичны для Culex pipiens (Khater 2003).Метанольный экстракт листьев Atlantia monophylla был эффективен против неполовозрелых стадий трех видов комаров, Cx . quinquefasciatus , Anopheles stephensi и Aedes aegypti , в лаборатории такое растение проявляло регулирующую активность в отношении насекомых (Sivagnaname and Kalyanasundaram 2004).

Несколько авторов зафиксировали морфологические аномалии после применения различных растительных экстрактов в сублетальных концентрациях.Сообщалось о пигментированных личинках и фаратных куколках после обработки кунжутным маслом (Khater 2003). Куколки-альбиносы наблюдались после промежуточных стадий личинка-куколка с маслом пажитника (Halawa 2001). После обработки кунжутным, нигелловым и луковым маслами было зафиксировано отсутствие взрослой эклозии и деформация брюшка и ног (Khater 2003).

Что касается биологических аспектов, то данные показали удлинение периодов развития личинок из-за обработки сублетальными концентрациями C . осмофлеум и N . Экстракты sativa , 10,75 и 9,23 дня соответственно. Аналогичные результаты были зарегистрированы на Cu. pipiens после обработки маслами лука, кунжута и нигеллы, 12,6, 9,3 и 8,5 дней соответственно (Эль-Барки, 1993).

Продление периодов развития произошло из-за того, что растительные экстракты могут обладать регулирующей рост насекомых активностью, которая может подавлять развитие насекомых (Sivagnaname and Kalyanasundaram 2004).

Однако отсроченный эффект некоторых растительных экстрактов, скорее всего, связан с нарушением эндокринных механизмов, регулирующих линьку и метаморфоз.Этот механизм действия предполагался ранее для большинства растительных экстрактов (Zebitz 1986).

БТИ® | СИНКА

Эндорет®
Регенеративная медицина

ENDORET® — биомедицинская технология, направленная на стимуляцию регенерации тканей путем применения аутологичных белков.
Сотни эндогенных белков влияют на процессы восстановления тканей, включая ангиогенез, хемотаксис и пролиферацию клеток. Никакой экзогенный агент не может эффективно управлять всеми этими процессами. Технология ENDORET® обеспечивает необходимые средства для получения плазмы, богатой факторами роста, из цельной крови.
Имплантаты BTI®
Зубные имплантаты ПРЕМИУМ

Новейшие разработки BTI®, линейка CORE — набор имплантатов с 5 различными диаметрами и разной длиной — позволяют решить 90% задач имплантации, запрашиваемых в стоматологических клиниках.Благодаря свойствам поверхности UnicCa® имплантаты BTI® обеспечивают большую стабильность кости и лучшая остеоинтеграция. Технология BTI® BioBlock® обеспечивает непроницаемость и биологическую герметизацию — наилучшее сочетание для предотвращения периимплантита.
Кексим и Кексим 2
Набор для извлечения имплантатов

ЕДИНСТВЕННАЯ СИСТЕМА на рынке, которая гарантирует атравматическое извлечение имплантатов с внутренним и внешним соединением.Набор для извлечения Kexim состоит из пяти эксклюзивных экстракторов, предназначенных для извлечения остеоинтегрированных имплантатов, когда они больше не работают или не нужны в новой ортопедической ситуации.
Инструменты BTI®
Хирургические инструменты

Щипцы с наконечниками из карбида вольфрама, которые используются в хирургии для удерживания, закрепления, соединения или сжатия тканей с минимальной травмой. Уплотнители костей, предназначенные для уплотнения кости вокруг имплантата после удаления или в травматическом синусовом возвышении… и многое другое.

Хроматограмма полного ионного тока (TIC) экстракта Bti (ESI(-))

Потребление гербицидов ежегодно увеличивается для повышения урожайности и качества урожая. Однако эти химические соединения опасны для окружающей среды, например, для почвы. Таким образом, возрастает тенденция к использованию природных биогербицидов.На самом деле эти «биосоединения» считаются менее вредными для окружающей среды и ее биоразнообразия. Однако оценка воздействия этих соединений на окружающую среду до сих пор широко не изучена. Это связано с многочисленными ограничениями в классических протоколах оценки (например, период полураспада). Таким образом, разрабатываются новые методы, основанные на омике, для адаптации новых подходящих протоколов и оценки риска для окружающей среды, связанного с такими продуктами биоконтроля. Недавно в лаборатории был разработан инновационный подход, основанный на метаболомике, в качестве альтернативного инструмента для оценки воздействия на окружающую среду.Этот подход, названный «Экологический метаболический след» (ЭМП), был применен к чистым химическим пестицидам в почве [1], а затем к комплексным биоинсектицидам в отложениях [2] с использованием жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Целью этого подхода является определение «времени устойчивости» как новой концепции интегративной оценки. Это соответствует времени, необходимому для диссипации соединения и его воздействия на матричный микробиом. Фактически этот подход учитывает анализ всего «метаметаболома» матрицы окружающей среды.Этот метаметаболом содержит пестицид и его побочные продукты (ксенометаболом), а также микробный метаболом. Таким образом, поскольку подход EMF доказал свою эффективность и несколько преимуществ, было рассмотрено улучшение этого подхода путем внедрения масс-спектрометрии высокого разрешения (HRMS) с использованием квадрупольного/времяпролетного масс-спектрометра (QToF MS). Это усовершенствование позволило повысить селективность за счет точного измерения массы. Следовательно, потенциальное смещение, вызванное помехами, было устранено. Кроме того, была предоставлена ​​необходимая информация для обнаружения и идентификации биомаркеров.Эти преимущества необходимы для изучения сложных природных биопестицидов, содержащих несколько неизвестных метаболитов. Таким образом, эта работа была применена для оценки воздействия природного комплексного биогербицида на окружающую среду; экстракт Myrica gale, содержащий «Миригалон А». Воздействие этого природного биогербицида можно сравнить с чистым синтетическим соединением Миригалона А. В исследование будет включен эталонный продукт «Сулкотрион», хорошо известный β-трикетоновый гербицид. Этот биогербицид, проявляющий высокое сродство к почве, делает мониторинг кинетики недостаточным для обилия низкой концентрации.Таким образом, интерес применения ЭМП заключается в анализе его побочных продуктов и влияния на микробный метаболом. Для этого был проведен 150-дневный кинетический эксперимент с 10 временными точками в почвенных микрокосмах. Для каждой обработки и временных условий было выполнено пять повторов. После экстракции почвы экстракты анализировали после оптимизации полного аналитического метода с помощью системы LC-QToF. Полученные данные были обработаны на онлайн-платформе «Workflow4metabolomics» после критического анализа и тщательной оптимизации параметров предварительной обработки.Обработанные данные были использованы для многомерного анализа, а время устойчивости было изучено путем сравнения микрокосмов, обработанных гербицидами, с микрокосмами, контролируемыми. Результаты показали высокое различие между контролируемой партией и партией экстракта Myrica gale. Следовательно, биомаркеры «вылавливают» и обнаруживают, чтобы идентифицировать дискриминантные метаболиты, чтобы мы могли лучше объяснить воздействие этого биогербицида на окружающую среду. [1]: Патил и др. 2016. Науч. Общая окружающая среда. 566–567: 552–558 [2]: Salvia et al. 2018. Окружающая среда. науч. Загрязн. Рез. 25(30):29841–29847

Экстракты конспецифических и аллоспецифических личинок побуждают комаров откладывать яйца и могут использоваться в стратегии борьбы с привлечением и уничтожением

активно вызывают откладывание яиц у взрослых комаров 3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13 , некоторые очевидно противоречивые результаты могут быть получены из-за смешанных факторов, таких как визуальные стимулы и скученность факторы.Особого внимания при оценке межвидовых взаимодействий заслуживают факторы скученности 14,15,16 . Чтобы обойти эти проблемы, мы измеряли поведение яиц, используя 150 мл воды на чашку и стандартные концентрации прямых экстрактов из личинок и куколок. Вдохновленный предварительными и многообещающими экспериментами с Ae. albopictus 10 , мы тестировали экстракты в количестве 1 эквивалента личинки или 1 эквивалента куколки на 3 мл воды, или 0,33 эквивалента на мл. Сначала были получены водные экстракты из личинок L4 Ae. aegypti и тестировали свежие экстракты против беременных самок Ae. aegypti , Ae. albopictus и Cx. пятифасциат . Оба Ae. aegypti (рис. 1А) и Ae. albopictus (рис. 1B) беременные самки продемонстрировали весьма значительное предпочтение чашкам, загруженным Ae. aegypti личинки, чем для контрольных чашек (только вода), с Cx. quinquefasciatus с умеренным предпочтением (рис. 1C). Точно так же беременные самки трех видов откладывали значительно больше яиц в чашки, содержащие водный экстракт из Ae.aegypti куколки, чем в водяных чашках (рис. 1D, E). Напротив, ни один из трех видов не отдавал предпочтения водным экстрактам из Ae в откладке яиц. aegypti яйца (рис. S1). Наши результаты отличаются от того, что сообщалось, т. е. ответы беременных Ae. aegypti самок в воде для выращивания личинок конспецификов существенно не отличались от контроля воды 3,12 . Это несоответствие может быть связано с разницей в экстрактах (вода для выращивания личинок по сравнению с прямым экстрактом) или потерей активности воды для выращивания личинок в течение короткого периода времени. Мы проверили долговечность наших экстрактов позже, но сначала спросили, можно ли экстрагировать аттрактант/стимулятор яйцекладки из Ae. альбопиктус . Опять же, беременные самки тестируемых видов откладывали значительно больше яиц в чашки, загруженные Ае. albopictus , чем в контрольных чашках (рис. 2A–C). Интересно, что экстракты куколки из Ae. albopictus были активны против сородичей и Cx. quinquefasciatus взрослых самки (рис.2D,F), но не против Ae. aegypti (рис. 2Е). Ае. albopictus отдавали предпочтение экстрактам яиц сородичей по сравнению с контрольными чашками с водой (рис. S2), но Ae. aegypti и Сх. quinquefasciatus — нет. Эти результаты в некоторой степени согласуются с более ранними предварительными экспериментами, показывающими, что экстракты из Ae. albopictus личинки и куколки (но не яйца) были активны в отношении беременных самок конспецифика 10 . Затем мы протестировали экстракты из Cx. quinquefasciatus L4 личинки и куколки. Опять же, беременные самки трех видов комаров отложили значительно больше яиц в чашки с личиночным экстрактом, чем в контрольные чашки (рис. 3A–C), а также в чашки с экстрактами из Cx. quinquefasciatus куколки, чем в обычных чашках с водой (рис. 3D–F). Хотя заманчиво предположить, что экстракты личинок из 90 003 Ae. aegypti, Ае. albopictus и Cx. quinquefasciatus имеют общий активный ингредиент (ингредиенты), это предположение требует дальнейшего тщательного тестирования и идентификации активного ингредиента (ингредиентов) этих экстрактов.

Рисунок 1

Предпочтение откладки яиц Ae. aegypti , Ae. albopictus и Cx. quinquefasciatus в водные экстракты из Ae. aegypti личинок или куколок по сравнению с водой. Среднее (±SEM) количество яиц, отложенных ( A ) Ae. aegypti и ( B ) Ae. albopictus и плоты для яиц, отложенные ( C ) Cx. quinquefasciatus в чашках с Ae. aegypti Экстракты личинок 4-й стадии развития и контрольные чашки (только вода).( D F ) Предпочтение откладывания яиц одним и тем же видом при выборе Ae. aegypti только экстракты куколок и вода. N = 10 для каждого лечения. Для ясности данные представлены в процентах от предпочтения яйцекладки, при этом среднее количество яиц или яичных плотов представлено вместе с каждым столбцом. После преобразования арксинуса и прохождения теста нормальности Шапиро-Уилка каждый набор данных сравнивался с использованием двустороннего парного теста t .

Рисунок 2

Предпочтение яйцекладки Ae.albopictus, Ae. aegypti и Cx. quinquefasciatus в водные экстракты из Ae. albopictus личинок или куколок по сравнению с водой. Среднее (±SEM) количество яиц, отложенных ( A ) Ae. albopictus и ( B ) Ae. aegypti и плоты для яиц, отложенные ( C ) Cx. quinquefasciatus в чашках с Ae. albopictus Экстракты личинок 4-й стадии и контрольные чашки (только вода). ( D F ) Предпочтение откладывания яиц одними и теми же тремя видами в тестах с двойным выбором, сравнивающих Ae.albopictus только экстракты куколок и вода. N = 10 для каждого лечения. Для ясности данные представлены в процентах от предпочтения яйцекладки, при этом среднее количество яиц или яичных плотов представлено вместе с каждым столбцом. После преобразования арксинуса и прохождения теста нормальности Шапиро-Уилка каждый набор данных сравнивался с использованием двустороннего парного теста t .

Рисунок 3

Предпочтение яйцекладки по Cx. quinquefasciatus, Ae. aegypti и Ae. albopictus в водные экстракты из Cx.quinquefasciatus личинок или куколок по сравнению с водой. Среднее (±SEM) количество яичных плотов, отложенных ( A ) Cx. quinquefasciatus и яйца, отложенные ( B ) Ae. aegypti и ( C ) Ae. albopictus в чашках с Cx. quinquefasciatus Экстракты личинок 4-й стадии и контрольные чашки (только вода). ( D F ) Предпочтение откладывания яиц одними и теми же тремя видами в тестах с двойным выбором, сравнивающих Cx.quinquefasciatus только экстракты куколок и вода. N = 10 для каждого лечения. Для ясности данные представлены в процентах от предпочтения яйцекладки, при этом среднее количество яиц или яичных плотов представлено вместе с каждым столбцом. После преобразования арксинуса и прохождения теста нормальности Шапиро-Уилка каждый набор данных сравнивался с использованием двустороннего парного теста t .

Очень гидрофобное соединение n -генейкозан 17 было выделено из Ae.aegypti яиц, и было продемонстрировано, что он стимулирует усики 18 обоих Ae. aegypti и Ae. albopictus и, таким образом, предполагается, что он является аттрактантом для откладки яиц 17,18 . Затем мы проверили, можно ли экстрагировать активные ингредиенты органическими растворителями. Чтобы избежать эмульгирования при смешивании экстрактов с водой в чашках для откладки яиц, гексановые экстракты высушивали и восстанавливали в диметилсульфоксиде (ДМСО). Действительно, достоверной разницы в количестве яиц, отложенных Ae, не было.aegypti беременных самок в чашках с гексановым экстрактом по сравнению с контрольными чашками (рис. 4А). Напротив, чашки, наполненные экстрактами личинок ДМСО, отдавали значительное предпочтение по сравнению с контролем (вода плюс ДМСО) (рис. 4B). Аналогично Сх. quinquefasciatus показал значительное предпочтение ДМСО, но не гексановых экстрактов (рис. 4C, D). Мы повторили эти эксперименты и заметили тенденцию к тому, что контрольная группа получала больше яичных плотов, чем гексановых экстрактов, что позволяет предположить возможный сдерживающий эффект гексановых экстрактов.Мы предположили, что в наших водных экстрактах могут содержаться следы этих или других сдерживающих факторов. Чтобы проверить это предположение, мы провели жидкостную экстракцию активного материала и отдельно протестировали водную и органическую фазы. Следует отметить, что небольшая гелеобразная промежуточная фаза отбрасывалась после сбора водной фазы и до начала сбора гексановой фазы. Отдавалось явное предпочтение беременным Cx. quinquefasciatus по откладке яиц в водную фракцию по сравнению с контролем (рис.5А), тогда как органическая фаза показала сдерживающий эффект (рис. 5В). Поэтому мы пришли к выводу, что водные экстракты содержат как стимулятор(ы)/аттрактант(ы) яйцекладки, так и сдерживающий(е) агент(ы), причем первый уравновешивает последний. Затем мы извлекли Cx. quinquefasciatus L4 с другими органическими растворителями и обнаружили аналогичные сдерживающие эффекты с диэтиловым эфиром, метанолом и бутанолом (рис. S3). Кроме того, мы предположили, что активный ингредиент представляет собой либо водорастворимое органическое соединение (соединения), либо белок (белки)/пептид (ы), которые не требуют фолдинга для обеспечения активности, в противном случае активность экстрактов ДМСО была бы потеряна 19 .

Рисунок 4

Комары, вызывающие желтую лихорадку и южные домашние комары, предпочитают откладывать яйца конспецифическим экстрактам личинок с гексаном или ДМСО. Предпочтение откладки яиц Ae. aegypti , сравнивая ( A ) гексановые и ( B ) ДМСО экстракты из конспецифических личинок 4-й стадии по сравнению с водой. Среднее (±SEM) количество яичных плотов, отложенных Cx. quinquefasciatus в чашках, загруженных конспецифическими экстрактами личинок 4-й стадии, полученными с ( C ) гексаном или ( D ) ДМСО, и чашками с водой.

Рисунок 5

Доказательства наличия стимулятора(ов) и сдерживающего(их) яйцекладки в экстрактах из 4-й стадии Cx. пятифасциат . Водный экстракт личинок разделяли гексаном, а затем две фазы тестировали на предпочтительность откладывания яиц, т.е. ( А ) водную фазу и ( В ) гексановую фазу. Во избежание образования эмульсии гексановый экстракт сушили, а растворитель заменяли на ДМСО. В контрольную чашку добавляли равное количество ДМСО. N = 4 для каждого лечения.После преобразования арксинуса и прохождения теста нормальности Шапиро-Уилка каждый набор данных сравнивался с использованием двустороннего парного теста t .

Затем мы исследовали, повлияет ли лиофилизация на активность. Экстракты личинок комара желтой лихорадки были разделены на две группы; половину образца экстрагировали и затем выдерживали при 4 °C в течение трех дней, а другую половину образца лиофилизировали и через три дня экстрагировали непосредственно перед биоанализом. Ответы, вызванные охлажденными и лиофилизированными образцами, были значительно выше, чем ответы, наблюдаемые у соответствующих контрольных образцов (рис.6А,Б). Интересно, однако, что когда эти эксперименты проводились с более длительным сроком хранения (30 дней), охлажденный образец терял активность, тогда как лиофилизированный образец сохранял активность (рис. 6C, D). Эти эксперименты подтверждают то, что наблюдалось при прямой экстракции органическими растворителями. В частности, крайне маловероятно, что активные ингредиенты представляют собой органические молекулы низкой или средней молекулярной массы, которые испарились бы во время лиофилизации. Кроме того, эти данные показывают, что активный(е) ингредиент(ы) подвергается деградации при 4 °C, как и следовало ожидать от пептида или белка, содержащегося в неочищенном экстракте, который должен содержать протеолитические ферменты из кишечника комара.

Рисунок 6

Оценка стабильности стимуляторов яйцекладки, полученных из личинок. Ае. aegypti отдают предпочтение экстрактам личинок своего вида ( A ), хранившихся при 4 °C в течение трех дней, и ( B ), свежелиофилизированным, хранившимся при комнатной температуре и восстанавливаемым через три дня. Аналогичные эксперименты проводились со свежим экстрактом ( C ), хранившимся при 4 °C в течение 30 дней, и ( D ) со свежелиофилизированным экстрактом, хранившимся при комнатной температуре в течение 30 дней и восстановленным в день испытаний. N = 12 для каждого набора данных. Данные были преобразованы по арксинусу, и после прохождения критерия нормальности Шапиро-Уилка каждая группа сравнивалась с использованием двухсторонних парных тестов t .

В химической экологии очень распространено, что некоторые соединения действуют дозозависимым образом, являясь аттрактантом при более низких дозах и сдерживающим фактором при более высоких дозах. Поскольку во всех этих исследованиях мы использовали стандартную концентрацию 0,33 л-экв/мл, затем мы протестировали более низкие и более высокие дозы. Активность от 0,1–1 л-экв/мл увеличивалась дозозависимым образом (рис.7). Поэтому маловероятно, что стимулятор(ы)/аттрактант(ы) яйцекладки в наших водных экстрактах связан с факторами скученности. Если бы факторы перенаселения были извлечены из личинок, экстракты потеряли бы активность при более высоких дозах (например, 1 л-экв/мл), что представляло бы среду перенаселения. Активные приманки, вероятно, представляют собой экссудаты личинок (и куколок), но мы не можем однозначно определить, получены ли они из бактерий, обитающих в кишечнике комара, или из насекомого.

Рисунок 7

Влияние концентрации экстрактов личинок на стимуляцию яйцекладки.Экстракты личинок из 4-й стадии Ae. aegypti тестировали в помещении, сравнивая «стандартное разведение» 0,33 эквивалента личинок на мл (л-экв/мл) с более низкими и более высокими дозами. N = 12. Средние значения лечения сравнивали с контролем с использованием непараметрического критерия Фридмана.

Наконец, мы исследовали потенциальное применение этих экстрактов личинок в стратегиях привлечения и убийства. В частности, мы задались вопросом, будут ли эти экстракты активны в полевых условиях в сочетании с токсичным агентом.Количество яиц в ловушках, загруженных как экстрактом личинок, так и Bti, было значительно выше, чем в контрольных ловушках с водой плюс Bti (рис. 8). В заключение, экстракты личинок L4 имеют потенциальное применение в интегрированной борьбе с переносчиками. Логистику этой стратегии «привлеки и убей» можно упростить, если определить активные ингредиенты и использовать синтетические аналоги вместо громоздких сырых экстрактов. Однако в настоящее время в качестве приманки можно использовать экстракты из лиофилизированных личинок.

Рисунок 8

Предпочтение яйцекладки для экстрактов личинок в присутствии Bacillus thuringiensis israelensis (Bti). Bti добавляли в ловушки, загруженные экстрактами личинок 4-й стадии из Ae. aegypti , а также к контрольным влагоуловителям. Пары ловушек были установлены в восьми разных местах поля и проверялись каждые две недели. N   =   51. Средние значения сравнивали с использованием знакового рангового теста Уилкоксона для сопоставленных пар.

БТИ

БТИ-9.12.1 МОДЕЛИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ STAPHYLOCOCCUS AUREUS КЛИНИЧЕСКИЕ ИЗОЛЯТЫ, ПОЛУЧЕННЫЕ ОТ ПАЦИЕНТОВ, ПОСЕЩАЮЩИХ ГОНДАР УНИВЕРСИТЕТСКАЯ БОЛЬНИЦА.
Вагава Сендеку , Нега Берхейн и Дипак Верма    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.11.1 АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ТРАДИЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ IN VITRO РАСТЕНИЯ ПРОТИВ ПИЩЕВЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ В WOLDIA
Getnet Chekole, Baye Wedajo и Mulugeta Mulat    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9. 10.1 АССОЦИАЦИЯ ГЕНОВ TETA И TETB И МОДЕЛИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ K.PNEMONIAE, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ПАЦИЕНТОВ, ПОСЕЩАЮЩИХ ГОНДАРСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ПРЕПОДАВАТЕЛЬСКАЯ БОЛЬНИЦА
Нега Берхане* и Махелет Тегегне    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.9.1  КЛЕТОЧНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРОТИВ ФРАКЦИОНИРОВАННЫХ ЛИПОПОЛИСАХАРИДНЫЕ (ЛПС) АНТИГЕНЫ БРУЦЕЛЛ MELITENSIS 16M В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК
Дипак Кумар Верма , Nega Berhane Tessema, Wagaw Sendeku Chekole    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.8.1 ЭКСТРАКЦИЯ И ОЧИСТКА ФЕРМЕНТА ПАПИНА ИЗ ЛИСТ ПАПАЙИ И ФИТОХИМИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЛИСТА
М. Тигист , Б. Гетнет *, К. Беза , М. Эндаламав , М. Лулит , Д.Тамират , M.Tinsae    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.7.1 МИКРОБНАЯ ДИНАМИКА, РОЛИ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КОРЕФЕ, ТРАДИЦИОННОГО ФЕРМЕНТА ЭФИОПСКИЙ НАПИТОК
B. Getnet и А. Берхану    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9. 6.1  РАСПРЕДЕЛЕННОСТЬ АНЕМИИ СРЕДИ ПАЦИЕНТОВ, ПОСЕЩАЮЩИХ «АДИГРАТ» ЦЕНТР ЗДРАВООХРАНЕНИЯ В ГОРОДЕ АДИГРАТ, СЕВЕРНАЯ ЭФИОПИЯ
Арагава Земене*, Гебрекидан Велегерима    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.6.2 ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ НУТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ISSR МАРКЕРЫ
Наутиял1*, Р.К. Panwar2    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.1.1 АМПЛИКАЦИЯ И КЛОНИРОВАНИЕ ВИРУСНОГО ГЛИКОПРОТЕИНА БЕШЕНСТВА GENE IN pALPHA VECTOR
Ankita Kanojia and Anant Rai    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.1.2 ЭКСПРЕССИЯ ГЛИКОПРОТЕИНА Вирулентного вируса бешенства, клонированного в pALPHA VECTOR
Анкита Каноджиа и Анант Рай    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.1.3 ОЦЕНКА КАЧЕСТВА РЕКИ ГАНГА В ХАРИДВАРЕ С ССЫЛКА НА РАЗЛИЧНЫЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ
R. Bhutiani, D.R. Кханна, Кхуши Рам, Фахим Ахамад и Варун Тьяги    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9. 2.1 НАНОЧАСТИЦ ЛАНТАНИДА, ИНКАПСУЛИРОВАННЫЙ ПОЛИМЕРНЫЙ ГИБРИД КАПСУЛЫ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ БИОИЗОБРАЖЕНИЯ
Кезия Джеймс, Рахимол К.Р., Шри Сивакумар, Сабу Томас, Раджи В., Нандакумар Калариккал    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.2.2 ИММУНОГЕННОСТЬ РЕКОМБИНАНТНОЙ ПЛАЗМИДЫ pALPHA, КОДИРУЮЩЕЙ БЕШЕНСТВО ВИРУЛЕНТНЫЙ ВИРУС ГЛИКОПРОТЕИН ГЕН
Анкита Каноджиа и Анант Рай    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.2.3 ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЦЕНКА БАКТЕРИЙ КОРОВЬЕГО НАМЕТА ДЛЯ ИХ ПРОТИВОМИКРОБНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ
Картикея Кумар Гупта и Дипаншу Рана    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.3.1   ПРОТИВОМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИЗОЛЯТОВ – СКРИНИНГОВОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Картикея Кумар Гупта и Дипаншу Рана    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.3.2 r-ДНК ВАКЦИНЫ И ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ
Манджуша Тьяги и Анант Рай    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9. 3.3  АНТИМИКРОБНОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭКСТРАКТА LIPIDIUM SATIVUM НА НЕКОТОРЫЕ КЛИНИЧЕСКИ ВЫДЕЛЕННЫЕ БАКТЕРИИ ИЗ ГОНДАРСКОГО УНИВЕРСИТЕТА Учебного стационара
Арагава Земене, Нега Берхане    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.4.1 Синтез оксида азота из активированных моноцитов, вызванных фракционированным растворимым (цитоплазматическим) антигеном B. melitensis 16M в клеточной культуре
Deepak Kumar Verma, Nega Berhane, Wawaw Sendeku скачать PDF PDF

БТИ-9.4.2 ИССЛЕДОВАНИЕ ОЧИСТКИ ОФИСНОЙ МАКУЛАТУРЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ФИЛЬТРАТА КУЛЬТУРЫ ASPERGILLUS FUMIGATUS FRESENIUS (MTCC 3070)
Пунит Кумар, Дришти Сегал, Кашьяп Кумар Дубей    Скачать pdf    Посмотреть pdf

BTI-9.4.3  ОЦЕНКА ПРАКТИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ В ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКОМ ОТДЕЛЕНИИ УНИВЕРСИТЕТА ГОНДАРСКОЙ СПЕЦИАЛЬНО-УЧЕБНОЙ БОЛЬНИЦЫ, СЕВЕРО-ЗАПАДНАЯ ЭФИОПИЯ
Эшети Мелесе Бирру, Бхарат Мишра    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9. 5.1  ОЦЕНКА ПРАКТИКИ ВЫДАЧИ И СВЯЗАННЫХ ФАКТОРОВ К КОНСУЛЬТАЦИИ ПО ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВАМ ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ В ДЕССИ ТАУН, СЕВЕР ВОСТОЧНАЯ ЭФИОПИЯ
Сейфе А. Асраде* , Бхарат Мишра    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.5.2  ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛИ АЛЬФА-308 ПОЛИМОРФИЗМ ГЕН И РИСК PLASMODIUM FALCIPARUM МАЛЯРИЯ СРЕДИ ЛЮДЕЙ, ЖИВУЩИХ В ДЕМБИИ ВОРЕДА, СЕВЕРО-ЗАПАДНАЯ ЭФИОПИЯ
Кибренеш Тегенау, Нега Берхане, Вагава Сендеку, Мулугета Аемеро, Десалень Менгеша    Скачать pdf    Посмотреть pdf

БТИ-9.5.3 ИНДУКЦИЯ И РОСТ ВОЛОСИСТЫХ КОРНЕЙ У BRASSICA JUNCEA L.CZERN (ИНДИЙСКАЯ ГОРЧИЦА)
А. Мохамед Исмаил    Скачать pdf    Посмотреть pdf

Состав комплекса споровых токсинов Bacillus thuringiensis и Lysinibacillus sphaericus, выращенных в условиях твердофазной ферментации

https://doi.org/10.1016/j.biocontrol.2019.01.005Получить права и содержание Были приготовлены Bacillus thuringiensis israelensis и Lysinibacillus sphaericus .

Конечный продукт SSF каждого организма нагревают при 40°C в течение двух часов.

Конечный продукт SSF каждого организма обрабатывали консервантами.

Жидкий экстракт SSF каждого организма обрабатывали консервантами.

Жидкий экстракт продукта SSF каждого организма готовили путем добавления носителей.

Abstract

Изучен состав продуктов цельной твердофазной ферментации (SSF) Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) и Lysinibacillus sphaericus (Ls14N1) и их экстрактов.Результаты рецептуры конечных продуктов SSF показали, что сушка при 40°C была одним из наиболее эффективных методов рецептуры обеих протестированных культур с сохранением полной москитоцидной активности в течение не менее 8 месяцев. Конечный цельный продукт SSF Ls14N1 был эффективно приготовлен путем добавления 0,3% пропионовой кислоты или 0,3% уксусной кислоты и был полностью активен против личинок Culex pipiens после 8 месяцев хранения при комнатной температуре. Также добавление аскорбиновой кислоты 0,05%, бензоата натрия 0.3%, лимонная кислота 0,2% или хлорид натрия 10% были перспективными консервантами для продукта Ls14N1 SSF. Однако продукт Bti SSF был приготовлен путем добавления 25–70% сахара и полностью сохранял свою активность в течение 4 месяцев. С другой стороны, рецептура жидких экстрактов продукта SSF была изучена, чтобы иметь жидкие и порошкообразные препараты. Лучшими консервантами для жидкого экстракта комплекса споровых токсинов (STC) Ls14N1 были хлорид кальция 20–40%, бензоат натрия 3–6%, хлорид натрия 10–100%, сорбат калия 2% или уксусная кислота 1%.Кроме того, жидкий экстракт STC Ls14N1 был эффективно приготовлен в твердой форме путем добавления крахмала Chipsy, пшеничной муки или муки из зародышей пшеницы в качестве носителей. Эти составы проявляли почти москитоцидную активность после 10 месяцев хранения. Для приготовления жидкого экстракта Bti лучшими консервантами были бензоат натрия 3–6% или хлорид натрия 10–20%. С другой стороны, крахмал Chipsy и пшеничная мука были наиболее перспективными носителями для приготовления твердого состава. Все эти составы Bti были полностью активны в течение 8 месяцев.Это исследование может содержать простые, экономичные и эффективные методы приготовления противомоскитных составов Ls и Bti противомоскитных токсинов, произведенных по технологии SSF.

ключевые слова

твердого государства ферментация

комарноцитал токсины

lysinibacillus sphaericus

Bacillus Thuringiensis

Spore Toxin Complex

Complemation

Рекомендуемая статьи

Рекомендуемое сопоставление Статьи (0)

Посмотреть полный текст

© 2019 Elsevier Inc.Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Ссылающиеся статьи

Устойчивость токсической активности ферментационных экстрактов из Bacillus thuringiensis var. israelensis после более чем трех десятилетий хранения

Int J Microbiol. 2017; 2017: 5402748.

, 1 , 1 , 1 , 1 , 2 , 1 и 1

Луис Хесус Галан-Вонг

1 Instituto de Biotechnologia, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autonoma de Nuevo León, Ciudad Universitaria, 66450 San Nicolás de los Garza, NL, Mexico

Rossana Gamiño-Hernández

1 Instituto de Biotechnologia, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autonoma de Nuevo León, Ciudad Universitaria, 66450 San Nicolás de los Garza, NL, Mexico

David Fernández-Chapa

1 Instituto de Biotechnologia, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autonoma de Nuevo León, Ciudad Universitaria, 66450 San Nicolás de los Garza, NL, Mexico

Graciela García-Díaz

1 Институт биотехнологии, Факультет биологических наук, Автономный университет Нуэво-Леона, Университет Сьюдад, 66450 Сан-Николас-де-лос-Гарса, Нидерланды, Мексика

Мириам А.

Де Ла Гарса-Рамос

2 Центр исследований/факультет одонтологии, Автономный университет Нуэво-Леон, Calle Dr. Eduardo Aguirre Pequeño y Silao s/n, Colonia Mitras Centro, 64460 Monterrey, NL, Mexico

Claudio Guajardo-Barbosa

1 Instituto de Biotechnologia, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autonoma de Nuevo León, Ciudad Universitaria, 66450 San Nicolás de los Garza, NL, Mexico

Hugo Alberto Luna-Olvera

1 Институт биотехнологии, Факультет биологических наук, Автономный университет Нуэво-Леона, Университет Сьюдад, 66450 Сан-Николас-де-лос-Гарса, Нидерланды, Мексика

1 Институт биотехнологии, Факультет биологических наук, Автономный университет Нуэво-Леона, Университет Сьюдад, 66450 Сан-Николас-де-лос-Гарса, Нидерланды, Мексика

2 Centro de Investigación/Facultad de Odontología, Автономный университет Нуэво-Леона, Calle Dr.Eduardo Aguirre Pequeño y Silao s/n, Colonia Mitras Centro, 64460 Monterrey, NL, Mexico

Автор, ответственный за переписку.

Академический редактор: Джузеппе Коми

Поступила в редакцию 4 августа 2017 г.; Пересмотрено 11 октября 2017 г .; Принято 31 октября 2017 г.

Copyright © 2017 Luis Jesús Galán-Wong et al.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего цитирования оригинальной работы.

Abstract

Это исследование было проведено для определения стойкости токсичности экстрактов ферментации Bacillus thuringiensis var. israelensis после более чем трех десятилетий хранения. Для этого была создана популяция из Aedes aegypti . Смертность 20 экстрактов кристаллов спор, очищенных методом соосаждения ацетоном и лактозой, измеряли и оценивали с помощью биоанализа в соответствии с модифицированным протоколом ВОЗ.Экстракты с самым высоким уровнем смертности определяли в трех повторностях по их LD 50 и LD 98 . Все экстракты показали токсичность при самой высокой испытанной дозе (1000 млн), а некоторые, такие как штаммы 3260 и 3501, по-прежнему убивали личинок даже при таких низких дозах, как 0,01 млн. Эти данные удивительны, поскольку не сообщалось об исследованиях активности токсичных белков B. thuringiensis после столь длительного времени хранения.

1. Введение

В настоящее время комары представляют одну из самых серьезных угроз для здоровья населения из-за своей гематофагической природы и способности переносчиков.Некоторые роды, такие как Aedes, Anopheles, и Culex, , переносят патогены и паразиты (вирусы, простейшие или нематоды), вызывающие разрушительные заболевания, такие как денге, Зика, чикунгунья, энцефалит, желтая лихорадка, малярия и слоновость. которые в совокупности ответственны за высокую заболеваемость и смертность миллиардов людей, раскинувшихся почти на половине планеты [1–6].

Потребность в более экологически безопасных инсектицидах и повышенная устойчивость к химическим веществам предоставили прекрасную возможность уничтожить комаров с помощью биологических препаратов на основе Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) . Эти бактерии консервируют параспоральные кристаллы и споры серотипа Н-14, которые при проглатывании личинками комаров солюбилизируются в щелочной среде средней кишки. Это приводит к активации инсектицидных белков кристалла, которые связываются с рецепторами в клеточной стенке и образуют кишечные поры, что приводит к гибели личинок. Этот инсектицидный эффект вызывают четыре токсина, известные как Cry4A, Cry4B, Cry11Aa и Cyt1A. Их основными свойствами являются высокая токсичность и специфичность по отношению к семейству Culicidae [7–9].

С момента своего открытия и описания Гольдбергом и Маргалитом [10] Bti показал замечательную эффективность в уничтожении комаров, в отличие от его безвредности для людей и других млекопитающих, водных позвоночных, беспозвоночных и растений. Из-за этих характеристик коммерческие препараты этих бактерий были выбраны для программ борьбы с комарами [11–14]. Дулмейдж и др. [15] были одними из самых важных пионеров в разработке технологий для внедрения Bti в качестве биологического агента борьбы с вредителями. Они установили различные методологии для массового производства, разработки продуктов и стандартизации мощности. В результате этих процессов несколько сотен экстрактов ферментации культур, принадлежащих этому микроорганизму, характеризующихся их инсектицидной активностью против двукрылых, были переданы в дар нашей исследовательской группе Министерством сельского хозяйства США в 1989 году. С тех пор эти экстракты хранятся в Международной коллекции энтомопатогенных бацилл Автономного университета Нуэво-Леон (UANL).Особенно важными в этой коллекции являются 20 экстрактов ферментации, которые мы решили использовать в этом исследовании, чтобы доказать их способность убивать комаров в лабораторных условиях за счет их остаточной активности.

2. Материалы и методы

2.1.

Bti Штаммы

Экстракты ферментации Bti из коллекции Dulmage et al. [15], восстановленные соосаждением лактозы с ацетоном в период с 1978 по 1983 гг. В течение этого периода экстракты хранили в темноте в сухом помещении исключительно для этой цели при температуре 25 ± 3°С в стерильных и герметичных флаконах. Двадцать четыре образца штамма HD-500 и двадцать пять образцов HD-567 исследовали под микроскопом с простым окрашиванием кумасси голубым, чтобы удостовериться в отсутствии контаминации (). Затем их активировали в чашках Петри и инкубировали в питательном агаре BD Bioxon в течение 72 часов, чтобы продемонстрировать их жизнеспособность, после чего отбирали образцы, демонстрирующие жизнеспособность.

Схема экспериментальной процедуры.

2.2. Комары

Личинки третьего и четвертого возрастов A.aegypti , используемые в этих экспериментах, были получены от инсектария Института биотехнологии Школы биологии УАНЛ. Эта колония комаров постоянно содержится в свободных от патогенов условиях при температуре от 28 до 30°C, относительной влажности от 60 до 80% и цикле свет/темнота 12 часов. В этих условиях цикл от яйца до взрослой особи завершается за три-четыре недели. Личинок ежедневно кормили предварительно стерилизованным кормом для собак мелкого помола (торговая марка Pedigree). Куколки удаляли ежедневно для контроля возраста комаров и помещали в контейнер, который помещали в клетку на 48 ч для появления взрослых комаров.В зависимости от величины популяции комаров использовали клетки разного размера, которых ежедневно кормили 10% раствором глюкозы, смоченным ватными тампонами, и каждые 3 дня источником крови в течение 10 мин. Яйцекладку самок стимулировали яйцекладкой, состоящей из емкости с водой, накрытой коричневой бумагой. Собранные яйца переносили в лотки для поддержания цикла таким образом, чтобы личинки, использованные во всех экспериментах, были доступны.

2.3. Приготовление стандарта

В качестве положительного контроля (смертность 100%) готовили первичный стандарт из VectoBac® 3000 UTI/мг (Valent BioSciences Corp.Либертивилль, Иллинойс) при концентрации 0,05 млн. Его помещали в чашки Петри с питательным агаром. Отбирали бульон, переносили в питательный бульон и инкубировали при 30°С при 150 об/мин в течение 12 часов до достижения оптической плотности более 1 (2 × 10 8  КОЕ/мл), измеренной на спектрофотометре при длине волны 540 нм. было достигнуто. Аликвоту по 1 мл в трех экземплярах добавляли в колбы Эрленмейера на 500 мл со 100 мл среды Bti (неопубликованная экспериментальная среда) для проверки активности экстрактов.В качестве отрицательного контроля использовали дистиллированную воду ().

2.4. Биоанализы

Соблюдались рекомендации Всемирной организации здравоохранения по лабораторным биоанализам бактериальных ларвицидов [16]. Суспензии каждого ферментационного экстракта готовили при концентрации 2000 частей на миллион в колбах Эрленмейера. Затем были сделаны разведения для получения конечных концентраций 1000, 100, 10, 1, 0,1 и 0,01 соответственно. Использовали прозрачные пластиковые стаканчики вместимостью 250 мл по 150 мл на сосуд и добавляли 25 личинок второй или третьей стадии ().Для расчета LD 50 ферментационных экстрактов готовили три суспензии 2%, 50% и 98%. Положительный контроль выполняли в двух повторностях с первичным стандартом. Результаты были сведены в таблицу в зависимости от дозы с учетом количества живых и мертвых комаров с 4 повторениями на обработку, выполненную в трех экземплярах через 24 часа. Для расчета LD 50 применяли линейную регрессию с использованием статистического пакета R, 2015 [17]. Биоанализы проводили не менее трех раз, и достоверность результатов оценивали с помощью первичного экстракта, полученного от VectoBac.

3. Результаты

Из 49 экстрактов ферментации Bti из коллекции только 20 все еще содержали споры в виде белковых кристаллов; поэтому в биоанализах использовались только они. Мертвых личинок подсчитывали каждые 6 часов в течение 24-часового периода (). В этом случае для расчета уровня смертности были включены умирающие личинки. Большинство этих экстрактов Bti проявляли некоторую токсическую активность в отношении личинок комаров в высоких концентрациях, но их активность снижалась по мере увеличения разбавления ().Таким образом, при 1000 ppm до 18 экстрактов удавалось в той или иной степени убить личинок; на самом деле 10 экстрактов были эффективны на 100%. Такая же тенденция наблюдалась при 100 млн, когда только экстракт из штамма 3299 не смог убить всех испытуемых насекомых, но при 10 млн только 5 экстрактов сохраняли эту эффективность. Интересный факт наблюдался для экстракта штамма 3260. Даже в концентрациях 1 и 0,1 он сохранял свою токсическую активность неизменной, убивая всех личинок. Однако при более высоком разведении (0.01 м.д.), экстракт не мог сохранять свою остаточную активность (). Стоит отметить, что токсическая активность как коммерческого продукта ВектоБак, так и полученного из него лабораторного препарата (ВА) сохранялась даже при самых низких концентрациях в условиях нашего эксперимента и вместе со штаммами 3260 и 3501 также проявляла устойчивую способность убивают личинок комаров при самых низких концентрациях. Так, ЛД 50 и ЛД 98 составили 0,01 ± 0,0 и 0,11 ± 0,01; 0.12 ± 0,0 и 1,07 ± 0,09; и 1,16 ± 0,02 и 3,6 ± 0,14 ppm для VectoBac, 3260 и 3501 соответственно ().

Токсичность Bacillus thuringiensis var. Экстракты ферментации israelensis в различных концентрациях по сравнению с Aedes aegypti (VC, коммерческий VectoBac; VA, активированный VectoBac).

LD 50 и LD 98 ферментационных экстрактов 3501 и 3260 из Bacillus thuringiensis var. израильский .

Таблица 1

Мертвых личинок подсчитывают каждые 6 часов после воздействия экстрактов.

9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 0 911 10 0 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9 9119 9 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 911 10 24 9119 91 110 23 9119 9119 9119 9119 911 10 25 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119
Лечение Moad Larvae Count *
Концентрация (PPM) / Время (h)
0.01 0,1 1 10 100 1000
1 6 12 18 24 1 6 12 18 24 1 6 12 12 18 24 1 6 12 18 24 1 6 12 18 24 1 6 12 12 18 24
Control ** 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 0 0 0 0 0 0 9 2858 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 0 0 9119 0 0 9119 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 9119 0 0 0 0 0 3826 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 0 0 0 0 9119 0 0 9019 9 0 0 0 9119 0 0 9119 9119 0 9119 0 9119 9119 0 9119 0 9119 0 0 9119 0 9119 9119 0 0 0
3859 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 0 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 0
3350 0 0 0 0 9119 0 9119 0 9119 9119 0 9119 0 9119 0 9119 0 0 9119 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 0 0 9119 0 1 2
3549 3549 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 2 3 4
3553 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 0 0 0 9119 9119 9119 9119 0 0 9 0199 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 4 5 9119 9 5
3356 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 0 9119 9119 9119 9119 0 0 9119 0 0 0 9119 9119 9119 0 0 0 0 0 9119 0 9119 9119 9119 9119 4 9 9119 9 6
3824 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 0 9119 0 9119 0 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 9
3552 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 6 10 9 4 3825 0 0 0 9119 0 0 0 0 0 1 3 0 0 2 4 5 9019 9119 0 0 2 3 6 9119 0 1 2 5 9 0 3 8 12 9 4 3999 0 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 9119 9119 0 0 0 0 2 8 14 19 19 0 0 0 9119 0 9119 0 0 9119 9119 0 0 1 1 0 0 1 4 5 3 7 11 9119 9 4 9119 4 11 17 21 8 20 25 25 25 25 3 9119 9119 0 0 9119 0 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 2 9119 2 9019 9 1199 9 9019 10 0 6 9019 15 9119 15 22 25 11 23 25 25 25
9 9119 9 9119 9119 0 9119 9119 9119 0 9119 9119 0 9119 0 0 3 5 5 0 0 1 4 13 0 4 12 9119 9 9 2 24 12 9119 9119 9119 12 22 25 25 25 25 25 25 25
0 0 9119 9119 0 9119 0 0 9119 0 9119 0 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 0 0 0 0 0 9119 9119 2 4 9 9119 8 20 25 9 9119 25 25 25 25 9119 9119 9112 25 25 25 3857 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 2 9019 14 9119 24 25 9 9119 25 25 25 25 25 25 25 3756 9119 0 9119 9119 0 9119 0 9119 0 0 1 1 0 0 2 4 5 4 9 18 21 9 24 13 9119 25 9119 9119 25 9119 25 25 25 9119 9119 25 9119 25 25 25 25 25
3696 0 0 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 0 1 4 0 0 3 5 8 0 5 14 19 23 9 25 9119 25 9119 25 25 25 9119 25 9119 25 25 25 25 25
0 0 9119 9119 9119 9119 9119 0 0 0 2 6 0 2 6 10 13 14 24 25 25 9119 9119 9119 9119 9119 25 9119 9119 9119 9119 25 9119 25 25 9119 25 25 9 25 25 25 25 25
0 0 0 9119 9119 9119 2 9019 8 9 9119 10 9119 13 13 16 25 25 25 25 23 25 25 25 25 25 25 25 25 9119 9119 25 25 25 25 9 0199 25 25 25 VA 16 25 9119 25 25 25 9119 25 9119 25 9119 25 25 9119 25 25 9119 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 9119 25 25 25 25 25 25 25 9119 25 25 25 9119 25 25 25 25 9119 VC 25 25 25 9119 9119 9119 25 25 25 25 25 9119 25 25 9119 25 9119 25 25 25 25 9119 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25

4.

Обсуждение

Наши результаты демонстрируют сохранение токсической активности ферментационных экстрактов Bti против A. aegypti после трех десятилетий хранения. Все исследованные экстракты показали токсичность при самых высоких испытанных дозах (1000 млн), а некоторые экстракты из штаммов 3260 и 3501 по-прежнему убивали личинок даже при таких низких дозах, как 0,01 млн. Такие данные вызывают удивление, поскольку ни одно исследование до настоящего времени не сообщало об активности токсичных белков B. thuringiensis после столь длительного времени хранения.С другой стороны, немногочисленные сообщения о стойкости токсичности в полевых условиях или в контролируемых условиях указывают на то, что эти белки быстро теряют свои инсектицидные свойства по разным причинам. К факторам окружающей среды, негативно влияющим на персистенцию токсичности, относятся температура [18], солнечная радиация [19], рН [20] и органические вещества [21]. Однако другие авторы показали, что некоторые условия благоприятствуют возможности увеличения их стойкости. Например, Саксена и др.[22] показали, что белки Cry из экссудатов корней Bt-кукурузы сохраняли свою ларвицидную активность в течение более 180 дней в почве, в то время как Тэпп и Стоцки [23] сообщали об этой же токсической способности более чем через 234 дня после их включения в почву. Вероятно, это связано с их связыванием с глинистыми частицами пористой матрицы. В нашем случае кристаллы белка Bti тестируемых экстрактов более трех десятков лет были покрыты лактозной матрицей, используемой при получении экстракта ферментации.Это указывает на важную роль, которую может играть этот дисахарид в поддержании активности токсичных белков различных штаммов Bti , особенно стабильных после этого периода времени. У других разновидностей этой бактерии из той же коллекции экстрактов ферментации (неопубликованные данные), защитный механизм которых пока неясен, такого же эффекта не проявляется. Хотя активность экстрактов Bti оказалась очень низкой по сравнению с обработкой VectoBac, примечательно, что большинство из них сохраняли остаточную активность при самых высоких протестированных концентрациях, а два из этих экстрактов выделялись при минимальных концентрациях, при которых они может убить личинок комаров. Это обнадеживающий признак возможности улучшения использования специальных штаммов и улучшенных составов для борьбы с насекомыми-переносчиками болезней.

5. Выводы

Экстракты ферментации из Bacillus thuringiensis var. israelensis сохраняли остаточную токсическую активность в отношении личинок Aedes aegypti после хранения при температуре 25 ± 3°C в вышеуказанных условиях в течение более трех десятилетий. Экстракты 3260 и 3501 показали LD 50 0.12 и 1,16 м.д. соответственно. Эта работа демонстрирует, что кристаллы белка Bti могут продлевать свою токсичность при хранении или в полевых условиях в определенных условиях.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Ссылки

1. Calvez E., Guillaumot L., Millet L., et al. Генетическое разнообразие и филогения Aedes aegypti, основного переносчика арбовирусов в Тихом океане. PLOS Забытые тропические болезни . 2016;10(1) doi: 10.1371/journal.pntd.0004374.e0004374 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]2. Eritja R., Escosa R., Lucientes J., et al. Всемирное нашествие комаров-переносчиков: настоящее распространение в Европе и проблемы для Испании. Биологические вторжения . 2005;7(1):87–97. doi: 10.1007/s10530-004-9637-6. [Перекрестная ссылка] [Академия Google]3. Цуй Ф., Раймонд М., Цяо К.-Л. Устойчивость к инсектицидам у комаров-переносчиков в Китае. Наука о борьбе с вредителями . 2006;62(11):1013–1022.doi: 10.1002/ps.1288. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]4. Готре П., Саймон Ф. Денге, чикунгунья и Зика и массовые собрания: что произошло в Бразилии, 2014 г. Медицина путешествий и инфекционные заболевания . 2016;14(1):7–8. doi: 10.1016/j.tmaid.2015.12.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]5. Лю Х., Лу Ю., Лю К. и др. Сравнение устойчивости к пиретроидам у взрослых и личинок Culex pipiens pallens (Diptera: Culicidae) из четырех полевых популяций в Китае. Журнал экономической энтомологии .2013;106(1):360–365. дои: 10.1603/EC11439. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]6. Marcondes C.B., Ximenes M.D.F.F.D.M. Вирус Зика в Бразилии и опасность заражения комарами Aedes (Stegomyia). Журнал Бразильского общества тропической медицины . 2016;49(1):4–10. doi: 10.1590/0037-8682-0220-2015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]8. Георгиу Г. П., Вирт М. С. Влияние воздействия одиночных и множественных токсинов Bacillus thuringiensis subsp. israelensis на развитие резистентности у комара Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) Прикладная и экологическая микробиология .1997;63(3):1095–1101. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Wirth MC, Delécluse A., Federici B.A., Walton WE. Переменная перекрестная устойчивость к Cry11B от bacillus thuringiensis subsp. jegathesan в culex quinquefasciatus (diptera: culicidae), устойчивых к одному или нескольким токсинам bacillus thuringienis subsp. Израильский. Прикладная и экологическая микробиология . 1998;64(11):4174–4179. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10. Голдберг Л. Дж., Маргалит Дж. Бактериальная спора, демонстрирующая быструю ларвицидную активность в отношении Anopheles sergentii, Uranotaenia unguiculata, Culex univitattus, Aedes aegypti и Culex pipiens. Новости комаров . 1977; 37: 355–358. [Google Академия] 11. Уотсон Т. М., Кей Б. Х. Компетентность Aedes notoscriptus (Diptera: Culicidae) в переносе вируса реки Росс в Квинсленде, Австралия. Журнал медицинской энтомологии . 1998;35(2):104–106. doi: 10.1093/jmedent/35.2.104. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Бойд А. М., Кей Б. Х. Вектор компетентности Aedes aegypti, culex sitiens, culex annulirostris и culex quinquefasciatus (diptera: culicidae) для лесного вируса барма. Журнал медицинской энтомологии . 2000;37(5):660–663. doi: 10.1603/0022-2585-37.5.660. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Рассел Т.Л., Браун М.Д., Пурди Д.М., Райан П.А., Кей Б.Х. Эффективность составов VectoBac (разновидность Bacillus thuringiensis israelensis) для борьбы с комарами в Австралии. Журнал экономической энтомологии . 2003; 96 (6): 1786–1791. doi: 10.1603/0022-0493-96.6.1786. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Лейси Л.А. Bacillus thuringiensis серотипа Israelensis и Bacillus sphaericus для борьбы с комарами. Журнал Американской ассоциации борьбы с комарами . 2007;23(2):133–163. doi: 10.2987/8756-971X(2007)23[133:BTSIAB]2.0.CO;2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Дулмаге Х. Т., Корреа Дж. А., Мартинес А. Дж. Соосаждение с лактозой как средство восстановления спорово-кристаллического комплекса Bacillus thuringiensis. Журнал патологии беспозвоночных . 1970; 15(1):15–20. doi: 10.1016/0022-2011(70)-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

16. Всемирная организация здравоохранения.Руководство по лабораторным и полевым испытаниям ларвицидов от комаров. стр. 1-41, Женева, 2005.

17. R Core Team. R: Язык и среда для статистических вычислений . Вена, Австрия: R Foundation for Statistical Computing; 2014. [Google Академия]18. Райт С.П., Моллой Д., Джамнбак Х., Маккой П. Влияние температуры и возраста на эффективность Bacillus thuringiensis var. israelensis и Bacillus sphaericus штамм 1593 против личинок Aedes stimulans. Журнал патологии беспозвоночных .1981;38(1):78–87. doi: 10.1016/0022-2011(81)

-9. [Перекрестная ссылка] [Академия Google] 19. Беккер Н., Згомба М., Людвиг М., Петрич Д., Реттич Ф. Факторы, влияющие на активность Bacillus thuringiensis var. лечение израильское. Журнал Американской ассоциации борьбы с комарами . 1992;8(3):285–289. [PubMed] [Google Scholar] 20. Ignoffo C., Garcia C., Kroha M., Fukuda T., Couch T. Лабораторные тесты для оценки потенциальной эффективности Bacillus thuringiensis var. israelensis для борьбы с комарами. Новости комаров . 1981; 41: 85–93. [Google Академия] 21. Van Essen F.W., Hembree SC. Смоделированные полевые исследования с использованием четырех составов Bacillus thuringiensis var. israelensis против комаров: остаточная активность и действие компонентов почвы.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.

Можно использовать следующие HTML-теги и атрибуты:
<a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>